九游官方网页版和数明小讲堂(táng) | 新冠(guàn)核酸检测之PCR技术(shù)
疫情防控
科学防疫(yì) 九游官方网页版和数明有“芯”
当前上海正处于抗新型冠状病毒肺炎疫(yì)情防控的关键(jiàn)阶段,在这个(gè)没有硝烟的战场(chǎng)上,及时快速地筛查新冠感(gǎn)染者(zhě)并(bìng)及时进(jìn)行隔离是阻止新冠病毒肆意蔓延(yán)的最有效且唯(wéi)一的手(shǒu)段。核酸检测是目(mù)前筛查新冠感(gǎn)染者最精准、有效、低成本的技术(shù)方式。
什么是PCR?
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction), 简称(chēng)PCR, 又称(chēng)多聚酶(méi)链式反应,是一项利用(yòng)DNA双链复制的原理,在生物体外(wài)复制特定DNA片(piàn)段的核酸合成技(jì)术。透过这项(xiàng)技术,可在(zài)短时间(jiān)内大量扩增目的基因,而(ér)不必依(yī)赖大肠杆(gǎn)菌或酵母菌(jun1)等生物体。
PCR扩增(zēng)的三个(gè)基本步骤(zhòu)
(1)变性:模板(bǎn)DNA经(jīng)加热至94℃左右并保持一定时(shí)间(jiān)后,基(jī)于DNA半保留复制原(yuán)理,还有(yǒu)碱基互补配对原(yuán)则,即复(fù)制(zhì)的过程(chéng)中(zhōng)双链DNA会解链,由双链变成单链,为下轮反应(yīng)做准备;
(2)退火(huǒ):模(mó)板DNA经加热变(biàn)性成单链后,温度降至(zhì)55℃左右,引物(wù)与模板DNA单链的互补序列配对结合;
(3)延伸:温(wēn)度再(zài)升至72℃左右,在DNA聚(jù)合酶的作(zuò)用下(xià),把游离的dNTP按(àn)照碱(jiǎn)基互(hù)补配对原(yuán)则结(jié)合到单(dān)链上,形成一条由旧链(liàn)和新链杂合成的(de)新的双链DNA。
PCR扩增原理:变形-退火-延伸温度(dù)循环
理(lǐ)论上,经过上面(miàn)步骤,目标DNA浓度可增加一倍。重复循环上述过(guò)程,可获(huò)得更多的“半保留复制链(liàn)”,而形成的新链又可(kě)成为下次循环的模板(bǎn)。每完成(chéng)一个循环需2~4分钟, 仅需(xū)2~3小时就能(néng)将目标DNA扩增放大几百万倍(bèi)。
全(quán)自动核酸提(tí)纯及实时荧光PCR分析系统
经过以上(shàng)分(fèn)析,我们就可以理解(jiě)为什么核酸检测结(jié)果最快能在几(jǐ)个小时内出结果。
实时(shí)荧(yíng)光PCR定量分(fèn)析
PCR扩增仪(yí)温(wēn)度控制指标(biāo)主要(yào)有:温度的准确性、均匀性、以及升降温(wēn)速(sù)度(dù)。
1. 温度(dù)的准确性:是指样品(pǐn)孔温度与设定温(wēn)度的一致性,它直接关系到实验的成(chéng)败(bài)。因(yīn)而(ér)对PCR扩增仪而(ér)言温度控制(zhì)就意味着产品质(zhì)量。
2. 温度(dù)的均(jun1)匀性:是指样(yàng)品孔间的(de)温度差异(yì),它关系到在不同样品孔(kǒng)进行反应(yīng)结果的一致性(xìng)。
3. 升降温速度:更(gèng)快(kuài)的升降温速度(dù),可以有效缩短(duǎn)反应(yīng)时间和(hé)可能的非特异性结合、反(fǎn)应的时(shí)间,从而提高PCR反应特(tè)异性。
相较于传统的(de)相对稳定耐用(yòng)的机(jī)械(xiè)式(shì),新的半(bàn)导体温控技术——TEC温度(dù)控制(zhì)技术具有升降温更快(kuài)速的优势,已经成为(wéi)PCR扩增仪的首(shǒu)选温度控制技(jì)术。
半导体制冷(lěng)器(qì) (Thermo Electric Cooler,简称 TEC) 是利用半(bàn)导体(tǐ)材料(liào)的帕(pà)尔贴效应(yīng)制成(chéng)的。如图下所示,帕尔帖效应是指当直流电流通过两种半导体(tǐ)材料组成(chéng)的电偶时,其(qí)一端吸热,一(yī)端放热(rè)的现(xiàn)象。TEC 包括一些 P 型和 N 型对(duì)(组(zǔ)),它们通过(guò)电(diàn)极连在一起,并且夹在两个(gè)陶瓷电极之间,当有电流从(cóng) TEC 流过时,电流产生的热量会从 TEC 的 一侧传到另一侧,在 TEC 上产生″热″侧和″冷″侧,这就是 TEC 的加热与(yǔ)致(zhì)冷原理。
帕尔帖(tiē)效(xiào)应(yīng),PN 节以及热流动示意图
PCR扩增仪一(yī)般具有(yǒu)两种温控模式,即模(mó)块(kuài)温(wēn)控模式(Block-control)和反应管温控模(mó)式(tube-control)。管(guǎn)内样品(pǐn)的温度无法与温(wēn)控模(mó)块同时达到(dào)预设温度,特别是(shì)PCR反应中的孵育过程一般为30秒或更短(duǎn),如果采用只有模(mó)块温控模式的话,反应混合物孵育(yù)的时间与(yǔ)程序设定的(de)时(shí)间会有相(xiàng)当大的差距。为了达到(dào)反应管内部温度精确控制,需采用反应(yīng)管控制模模式,通过(guò)温度控制算法进行参数标定和补偿(cháng),确保反应混合物按照程序设(shè)定的时间维持预设温度。
科技(jì)战“疫”,九游官方网页版和数明在行(háng)动
面对(duì)近期香港、深圳、上海等地奥(ào)密(mì)克戎的快速扩(kuò)散,核酸检(jiǎn)测能力在数量和(hé)速度方面都面临着极(jí)大(dà)的考验。九游官方网页版和数明半导(dǎo)体积极发(fā)挥了科技(jì)技(jì)术方面的优(yōu)势(shì),组织技术(shù)专(zhuān)家研究(jiū)PCR扩增技术的(de)优化解决方(fāng)案,以功(gōng)率器件(jiàn)门极驱动芯片和TEC控(kòng)制器为(wéi)着力点(diǎn),优先保障芯片供应和交付,与客户一起助力(lì)抗疫,共(gòng)克时艰。
九游官方网页版和数明半导体自研的20V-600V耐压(yā)全系列的(de)低边、半桥(qiáo)、三相半桥等功率管门极驱动芯片(SLM2103S、SLM2136等)可用于驱(qū)动(dòng)TEC,协助PCR扩增仪器客户快速、方(fāng)便地完成系统设计,在当前(qián)半导体供应短缺时期,可以满足(zú)客户设计方案的快速变更、验证与量产(chǎn)。
600V耐压(yā)半桥功率器件驱动(dòng)芯片工作示意图
600V耐压三相半桥(qiáo)功率器件驱动芯(xīn)片工作(zuò)示意图
九游官方网页版和数明半导体的单芯片TEC控制器产品——SLM8833/8834/8835 集成了TEC驱动电路、低温飘高精度温度(dù)误差放(fàng)大器(qì)及环路补偿电路、温度设定与传感电路,采用高效的单电感架构,实现更紧凑(còu)、更(gèng)高的转换效率及(jí)更低的(de)噪声;其中(zhōng)功率(lǜ)级(jí)集成了超(chāo)低阻抗(kàng)的MOSFET,损(sǔn)耗更低(dī)寿命更久;同时匹配模拟PID与数(shù)字PID两(liǎng)种(zhǒng)温(wēn)控模式(shì),以满(mǎn)足客户PCR扩增仪的小型化创新设计需求。
由SLM8834 构成的 TEC 系统框图
模拟PID温控器模(mó)式(shì)
数字PID温(wēn)控模式